依托改造后的根癌农杆菌Ti质粒T-DNA转移系统，去除质粒致瘤基因，构建安全的二元载体、三元载体系统。将目的基因与筛选标记基因插入T-DNA区域，在农杆菌Vir毒蛋白的诱导作用下，T-DNA切割、转移并整合至水稻细胞核基因组，实现外源基因的稳定插入与表达。常用农杆菌菌株为EHA105、AGL-1，适配水稻愈伤组织侵染体系。适用受体材料受体为水稻成熟种子诱导的胚性愈伤组织，材料获取不受季节、生育期限制，可全年开展转化实验；其次可选用水稻幼胚、幼穗诱导愈伤，再生能力更强，但取材受限。粳稻愈伤诱导与再生效率显著优于籼稻，籼稻是目前水稻转化的主要难点材料。受体材料制备选取授粉后10–14天的玉米雌穗，剥离幼嫩籽粒，无菌条件下分离长度1.5–2.0mm的未成熟合子胚，烟草转化，去除胚轴，备用为转化受体。该时期幼胚分生能力，转化与再生效率。3.农杆菌侵染与共培养将制备好的玉米幼胚浸入活化后的农杆菌侵染液，辅以短时离心、负压处理提升侵染效率；吸干多余菌液后，将幼胚置于共培养基上，22–25℃避光暗培养2–3天，实现T-DNA的转移与整合。根癌农杆菌Ti质粒上的T-DNA片段可在Vir毒蛋白下，自主切割、转移并整合至植物基因组。科研中已去除Ti质粒的致瘤基因，改造为安全的二元载体、超二元载体或三元载体系统，将目的基因插入T-DNA区域，借助农杆菌侵染实现外源基因的定向递送与整合。常用农杆菌菌株包括EHA105、AGL-1、LBA4404等，适配玉米幼胚侵染体系。主要以玉米未成熟合子胚（IZEs）为受体，该材料分裂能力强、再生；近年也开发出成熟种子胚外植体转化体系，可规避幼胚取材受生育期限制的问题，实现周年转化。烟草转化-武汉贝科新肽(图)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司是从事“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”的企业，公司秉承“诚信经营，用心服务”的理念，为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询！联系人：夏先生。)