用水稻原生质体进行亚细胞定位时，为什么不拍摄叶绿体的自发荧光？经测验，使用水稻黄化苗制备原生质体，载体转化效率及基因表达强度较高，而黄化苗中叶绿体较少，实时荧光定量，因此水稻原生质体定位拍照时，除非与叶绿体共定位，否则不拍摄叶绿体的自发荧光。为什么要提供GFP空载的对照图片？（1）作为整个实验过程中的操作参照，可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。（2）作为载体体系的参照，确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。亚细胞定位的方法荧光技术荧光技术是一种常用的亚细胞定位方法，它利用标记目标蛋白质，然后使用荧光显微镜观察其位置。这种方法具有高特异性、高灵敏度和高分辨率等优点，但也可能存在交叉反应等干扰因素。绿色荧光蛋白标记绿色荧光蛋白标记是一种非侵入性的亚细胞定位方法，它可以将目标蛋白质与绿色荧光蛋白融合，从而使其在荧光显微镜下可见。这种方法具有较好的特异性和灵敏度，但需要将目标蛋白质进行基因改造，可能影响其天然状态。GaMYB2在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析：采用基因轰击的方法，用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击，暗培养过夜后，在激光共聚焦显微镜下进行观察，从图A中可以看出对照GFP空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光，为组成型表达；从图B中发现GaMYB2-GFP的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光，这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构，定位在细胞核中，具有转录因子的一般特征。湖北实时荧光定量-贝科新肽(推荐商家)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司是湖北武汉,化学试剂的见证者，多年来，公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针，满足客户需求。在贝科新肽领导携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈，共创贝科新肽更加美好的未来。)