湖北荧光原位杂交技术-武汉贝科新肽(图)
植物原位杂交的应用包括:研究基因表达:通过观察荧光信号的位置和数量,可以确定目标基因在植物组织中的表达模式和位置。染色体定位:将目标基因与染色体中的特定位置进行比较,可以确定目标基因在染色体中的位置和分布。基因:通过原位杂交技术,可以确定目标基因的序列和位置,为基因提供重要的参考信息。检测物种或品种特异性:通过原位杂交技术可以检测出不同物种或品种之间基因表达的差异,从而为物种或品种特异性研究提供依据。遗传育种:通过原位杂交技术可以检测出不同品种之间基因表达的差异,从而为遗传育种提供重要的参考信息。原位杂交技术方法大致可分为:1.杂交前准备,包括固定、取材、玻片和组织的处理,如何增强核酸探针的穿透性、减低背景染色等;2.杂交;3.杂交后处理;4.显示(visualization):包括性自显影和非性标记的显色。固定原位杂交组织化学技术在固定剂的应用和选择上应兼顾到三个方面:保持细胞结构,限度地保持细胞内DNA或RNA的水平;使探针易于进入细胞或组织。DNA是比较稳定的,mRNA是相对稳定的但易为酶合成和降解。RNA却绝然不同,非常容易被降解。因此,对于DNA的定位来说,固定剂的种类和浓度并不十分重要。相反,在RNA的定位上,如果要使RNA的降解减少到低限度,那么,不仅固定剂的种类浓度和固定的时间十分重要,而且取材后应尽快予以冷冻或固定。菌落的裂解及DNA结合于纤维素滤膜(1)在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/LNaOH的小洼(0.75ml),使菌落面朝上,将滤膜放到小洼上,展平保鲜膜,使滤膜均匀湿润,让滤膜留于原处2-3分钟。(2)用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜,用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/LNaOH重复步骤(1)。(3)吸干滤膜,将滤膜转移到新的带有1mol/LTris·Cl(pH7.4)的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜,再重复一次该步骤。(4)吸干滤膜,把它转移到有1.5mol/LNaCl、0.5mol/LTris·Cl(pH7.4)的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜,荧光原位杂交技术,转移到一张干的滤纸上,置于室温20-30分钟,使滤膜干燥。(5)将滤膜夹在两张干的滤纸之间,在真空烤箱中于80℃干烤2小时,固定DNA。(6)将固定在膜上的DNA与32P标记的RNA进行杂交。湖北荧光原位杂交技术-武汉贝科新肽(图)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司坚持“以人为本”的企业理念,拥有一支高素质的员工队伍,力求提供更好的产品和服务回馈社会,并欢迎广大新老客户光临惠顾,真诚合作、共创美好未来。贝科新肽——您可信赖的朋友,公司地址:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号,联系人:夏先生。)
武汉贝科新肽科技有限公司
姓名: 夏先生 先生
手机: 15002786799
业务 QQ: 81680037
公司地址: 湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号
电话: 027-87381761
传真: -