应用于分子病理诊断的DNA测序技术有直接测序法和焦磷酸测序法。直接测序技术主要是Sanger等发明的双脱氧链末端终止法。其原理就是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，产生A、T、C、G4组不同长度的一系列核苷酸，然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测，从而获得DNA序列。直接测序法是基因突变检测的“金标准”，其优点是结果准确，重复性好，可检测整个测序范围内已知和未知突变点;缺点是步骤多，耗时长，灵敏度低，过程不易控制，在检测已知突变位点方面将逐渐被荧光定量PCＲ法替代。原位杂交试验收集斑马鱼的胚胎，在Holfretor水中培养，到达所需要的发育时期时，用蛋白酶去除卵膜，用4%多聚甲醛固定，分子病理技术服务，在4℃保存，二十四小时后用50%2%多聚甲醛溶液洗，然后换成，在-20C保存，待用（两天和两天以上的胚胎需要用处理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养，可阻断色素的形成）武汉科锐诺生物科技有限公司将少数菌落转移到纤维素滤膜上（1）在含有选择性的琼脂平板上放一张纤维素滤膜。（2）用无菌牙签将各个菌落先转移至滤膜上，再转移至含有选择性但未放滤膜的琼脂主平板上。应按一定的格子进行划线接种（或打点）。每菌落应分别划线于两个平板的相同位置上。后，在滤膜和主平板上同时划一个含有非重组质粒的菌落。（3）倒置平板，于37℃培养至划线的细菌菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。（4）用已装防水黑色绘图墨水的针头穿透滤膜直至琼脂，在3个以上的不对称位置作标记。在主平板大致相同的位置上也作上标记。（5）用Parafilm膜封好主平板，倒置贮放于4℃，直至获得杂交反应的结果。（6）裂解细菌，按本段下面所述方法，使释放的DNA结合于纤维素滤膜。分子病理技术服务-科锐诺生物由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司是从事“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”的企业，公司秉承“诚信经营，用心服务”的理念，为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询！联系人：王经理。)